Banco de sangre

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Inmunohematología y Banco deInmunohematología y Banco de
SangreSangre
Realizado por Samuel UtreraRealizado por Samuel Utrera
QuesadaQuesada

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ÍndiceÍndice
1.1. Inmunohematología ---------------------------------------------- Pag 3 - 22Inmunohematología ---------------------------------------------- Pag 3 - 22
- Introducción. ------------------------------------------------------------- Pag 4- Introducción. ------------------------------------------------------------- Pag 4
- Células Sanguíneas ---------------------------------------------------- Pag 5 - 7- Células Sanguíneas ---------------------------------------------------- Pag 5 - 7
- Plasma --------------------------------------------------------------------- Pag 8- Plasma --------------------------------------------------------------------- Pag 8
- Conceptos en Inmunohematología --------------------------------- Pag 9 - 11- Conceptos en Inmunohematología --------------------------------- Pag 9 - 11
- Reacciones serológicas ----------------------------------------------- Pag 12 - 14- Reacciones serológicas ----------------------------------------------- Pag 12 - 14
- Grupos sanguíneos ----------------------------------------------------- Pag 15- Grupos sanguíneos ----------------------------------------------------- Pag 15
- Sistema ABO/Rh --------------------------------------------------------- Pag 16 - 22- Sistema ABO/Rh --------------------------------------------------------- Pag 16 - 22
2.2. Banco de sangre ---------------------------------------------------- Pag 23-49Banco de sangre ---------------------------------------------------- Pag 23-49
-- Procedimiento de trabajo ----------------------------------------------- Pag 24-26Procedimiento de trabajo ----------------------------------------------- Pag 24-26
- Aparatos --------------------------------------------------------------------- Pag 27- Aparatos --------------------------------------------------------------------- Pag 27
- Reactivos -------------------------------------------------------------------- Pag 28- Reactivos -------------------------------------------------------------------- Pag 28
- Caso práctico de una transfusión -------------------------------------- Pag 29-49- Caso práctico de una transfusión -------------------------------------- Pag 29-49
3.3. Control de calidad interno ---------------------------------------- Pag 50 - 71Control de calidad interno ---------------------------------------- Pag 50 - 71
4.4. Control de calidad externo --------------------------------------- Pag 72 - 103Control de calidad externo --------------------------------------- Pag 72 - 103
5.5. Gestión de residuos ------------------------------------------------ Pag 104 - 113Gestión de residuos ------------------------------------------------ Pag 104 - 113
6.6. Riesgos laborales --------------------------------------------------- Pag 114 - 138Riesgos laborales --------------------------------------------------- Pag 114 - 138
7.7. Plano del laboratorio ----------------------------------------------- Pag 139 - 140Plano del laboratorio ----------------------------------------------- Pag 139 - 140

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InmunohematologíaInmunohematología

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IntroducciónIntroducción
 Componentes de la sangreComponentes de la sangre
 Células Sanguíneas (45%)Células Sanguíneas (45%)
- Hematíes- Hematíes
- Leucocitos- Leucocitos
- Plaquetas- Plaquetas
 Plasma sanguíneo (55%)55%)
- Agua- Agua
- Proteínas- Proteínas
- Azúcares- Azúcares
- Ácidos Grasos- Ácidos Grasos
- Sales Minerales- Sales Minerales

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Células SanguíneasCélulas Sanguíneas
 Glóbulos Rojos oGlóbulos Rojos o
Hematíes:Hematíes: Son células que tienenSon células que tienen
como función transportar el O2 acomo función transportar el O2 a
los tejidos y eliminando el CO2.los tejidos y eliminando el CO2.
Proceden a la regulación delProceden a la regulación del
equilibrio acido/base de la sangre.equilibrio acido/base de la sangre.
Tienen forma de disco bicóncavoTienen forma de disco bicóncavo
de unos 7 a 7,5 μm de diámetro.de unos 7 a 7,5 μm de diámetro.
Están compuestos por el 65% deEstán compuestos por el 65% de
agua y el 35 % de sustanciasagua y el 35 % de sustancias
sólidas (95% de hemoglobinas ysólidas (95% de hemoglobinas y
5% de lípidos).5% de lípidos).
Poseen en su superficie elPoseen en su superficie el
antígeno que determina el grupoantígeno que determina el grupo
sanguíneo llamado aglutinina. Lasanguíneo llamado aglutinina. La
cantidad normal de hematíescantidad normal de hematíes
oscila alrededor de los 4,2 a los 6oscila alrededor de los 4,2 a los 6
millones/mm.millones/mm.

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 Leucocitos:Leucocitos: Son células móviles
cuya función es la defensa del
organismo. Estas células, a
diferencia de los hematíes, no
presentan pigmentos. Son células
con núcleo, mitocondrias y otros
orgánulos celulares. Su tamaño
oscila entre los 8 y 20 nm de
diámetro. Algunos sirven para
destruir las sustancias extrañas
del organismo; otros tienen la
función de la creación de
anticuerpos. Los valores normales
varían desde los 4.000 a 10.000
millones/mm3.
 Hay varios tipos de leucocitos:
Eosinófilos, Basófilos, Neutrófilos,
Linfocitos (B y T) y Monocitos.

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 Plaquetas:Plaquetas: Son los elementosSon los elementos
mas pequeños de la sangre conmas pequeños de la sangre con
un diámetro que mide unos 2-3un diámetro que mide unos 2-3
µm de diámetro. En un mm cúbicoµm de diámetro. En un mm cúbico
hay cerca de 300.000 plaquetas.hay cerca de 300.000 plaquetas.
La vida media de una plaquetaLa vida media de una plaqueta
oscila entre 8 y 12 días.oscila entre 8 y 12 días.
 Son una fuente natural de factoresSon una fuente natural de factores
de crecimiento y estánde crecimiento y están
involucradas en la hemostasia,involucradas en la hemostasia,
iniciando la formación de coágulosiniciando la formación de coágulos
o trombos.o trombos.

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PlasPlasmama
 Representa el componente líquido de la sangre gracias a la cual las células
sanguinas pueden circular, representando aproximadamente el 55% del
volumen sanguíneo total.
 Está compuesto por un 90% de agua, un 7% de proteínas, y el 3% restante
está formado por ácidos grasos, glucosa, vitaminas, hormonas, Ó2, CO2 y,
además de productos de desecho del metabolismo como el ácido úrico. A
estos se les pueden añadir otros compuestos como las sales y la urea.
 La diferencia entre el plasma y el suero es que el plasma tiene factores de
coagulación y el suero no lo presenta.

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ConcConceptos básicos eneptos básicos en
 Antígeno.Antígeno. Los antígenos son moléculas capaces de producir una respuestaLos antígenos son moléculas capaces de producir una respuesta
inmune adaptativa. Normalmente son de naturaleza proteica aunqueinmune adaptativa. Normalmente son de naturaleza proteica aunque
también pueden ser carbohidratos. Los antígenos pueden ser reconocidostambién pueden ser carbohidratos. Los antígenos pueden ser reconocidos
por los anticuerpos producidos por linfocitos B o los linfocitos T.por los anticuerpos producidos por linfocitos B o los linfocitos T.
 Cada antígeno está definido por su anticuerpo, los cuales interactúan porCada antígeno está definido por su anticuerpo, los cuales interactúan por
complementariedad espacial. La zona donde el antígeno se une alcomplementariedad espacial. La zona donde el antígeno se une al
anticuerpo recibe el nombre de epítopo o determinante antigénico, mientrasanticuerpo recibe el nombre de epítopo o determinante antigénico, mientras
que el área correspondiente de la molécula del anticuerpo es el paratopo.que el área correspondiente de la molécula del anticuerpo es el paratopo.
 Las células presentan los antígenos al sistema inmune mediante unaLas células presentan los antígenos al sistema inmune mediante una
molécula de histocompatibilidad. Dependiendo del antígeno presentado ymolécula de histocompatibilidad. Dependiendo del antígeno presentado y
del tipo de molécula de histocompatibilidad, podrían activarse diferentesdel tipo de molécula de histocompatibilidad, podrían activarse diferentes
tipos de leucocitos.tipos de leucocitos.

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ConceConceptos básicos enptos básicos en
 Anticuerpos. Glicoproteínas producida por el sistema inmunitario del
cuerpo cuando detecta sustancias dañinas, llamadas antígenos.
 Identifica y neutraliza las sustancias extrañas al cuerpo y se encuentran en
el plasma y otros fluidos biológicos.
 Está constituido por unidades estructurales básicas, cada una de ellas conEstá constituido por unidades estructurales básicas, cada una de ellas con
dos grandes cadenas pesadas y dos cadenas ligeras de menor tamaño.dos grandes cadenas pesadas y dos cadenas ligeras de menor tamaño.

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Conceptos básicos enConceptos básicos en
 Antígenos Eritrocitarios.Antígenos Eritrocitarios. Se encuentran presentes en la membrana de losSe encuentran presentes en la membrana de los
hematíes.hematíes.
 Anticuerpos antieritrocitarios.Anticuerpos antieritrocitarios. Partículas proteicas que tienen afinidad porPartículas proteicas que tienen afinidad por
los glóbulos rojos. Se encuentran en el plasma/suero sanguíneo.los glóbulos rojos. Se encuentran en el plasma/suero sanguíneo.

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Reacciones SerológicasReacciones Serológicas
 En el laboratorio de serología de Banco de Sangre se utilizan conEn el laboratorio de serología de Banco de Sangre se utilizan con
frecuencia dos métdos: Aglutinación y Hemólisis.frecuencia dos métdos: Aglutinación y Hemólisis.
 Aglutinación.Aglutinación. La aglutinación es la técnica es la técnica más empleadaLa aglutinación es la técnica es la técnica más empleada
en el Banco de Sangre. Existen dos fases: 1) Sensibilización: en la cualen el Banco de Sangre. Existen dos fases: 1) Sensibilización: en la cual
el anticuerpo se adhiere físicamente al antígeno específico de lael anticuerpo se adhiere físicamente al antígeno específico de la
superficie de los glóbulos rojos (con o sin fijación de complemento) y nosuperficie de los glóbulos rojos (con o sin fijación de complemento) y no
es visible. 2) Aglutinación de eritrocitos, visible in vitro, en el que sees visible. 2) Aglutinación de eritrocitos, visible in vitro, en el que se
forman puentes o uniones entre eritrocitos sensibilizados. Si losforman puentes o uniones entre eritrocitos sensibilizados. Si los
anticuerpos son IgM la aglutinación ocurre inmediatamente después deanticuerpos son IgM la aglutinación ocurre inmediatamente después de
las ensibilización. Para demostrar sensibilización por anticuerpos IgG eslas ensibilización. Para demostrar sensibilización por anticuerpos IgG es
necesario utilizar soluciones o medios poten dadores,. Los fenómenos denecesario utilizar soluciones o medios poten dadores,. Los fenómenos de
sensibilización y aglutinación están influenciados por varios factores:sensibilización y aglutinación están influenciados por varios factores:
temperatura (La temperatura para reacción óptima de anticuerpos varía:temperatura (La temperatura para reacción óptima de anticuerpos varía:
ej. IgG tiende a reaccionar mejor a 37oC e IgM a temperatura ambiente oej. IgG tiende a reaccionar mejor a 37oC e IgM a temperatura ambiente o
temperaturas frías), pH, tiempo de incubación (necesario para que latemperaturas frías), pH, tiempo de incubación (necesario para que la
reacción antígeno anticuerpo alcance un equilibrio) fuerza iónica delreacción antígeno anticuerpo alcance un equilibrio) fuerza iónica del
medio, etc.medio, etc.

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ReaccionesReacciones SerológicasSerológicas

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Reacciones SerológicasReacciones Serológicas
 Hemólisis.Hemólisis. Algunos anticuerpos cuando reaccionan contra antígenos oAlgunos anticuerpos cuando reaccionan contra antígenos o
grupos sanguíneos específicos producen por consiguiente lisas de losgrupos sanguíneos específicos producen por consiguiente lisas de los
eritrocitos. Estos anticuerpos se llaman hemolisinas, Ej: Anti A, antí B, antíeritrocitos. Estos anticuerpos se llaman hemolisinas, Ej: Anti A, antí B, antí
AB, Lea, Leb, JKb, etc. Los anticuerpos IgG e IgM pueden fijarAB, Lea, Leb, JKb, etc. Los anticuerpos IgG e IgM pueden fijar
complemento sin causar hemólisis. Las enzimas remueven el ácido siálicocomplemento sin causar hemólisis. Las enzimas remueven el ácido siálico
de la membrana de los eritrocitos y por lo tanto disminuye la carga negativade la membrana de los eritrocitos y por lo tanto disminuye la carga negativa
y con ello, el potencial zeta.y con ello, el potencial zeta.

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Grupos SanguíneosGrupos Sanguíneos
 Un grupo sanguíneo es una forma de agrupar ciertas características enUn grupo sanguíneo es una forma de agrupar ciertas características en
base a la presencia o ausencia de determinados antígenos sobre labase a la presencia o ausencia de determinados antígenos sobre la
superficie de los hematíes.superficie de los hematíes.
 Los grupos sanguíneos se dividen en:Los grupos sanguíneos se dividen en:
 Grupo hemático, constituido por Ag eritrocitariosGrupo hemático, constituido por Ag eritrocitarios
 Grupo sérico, constituido por Ac antieritrocitariosGrupo sérico, constituido por Ac antieritrocitarios
 Estos grupos constituyen el sistema ABO y el sistema Rheus (Rh)Estos grupos constituyen el sistema ABO y el sistema Rheus (Rh)
 Otros grupos sanguíneos:
 Sistema MNS, Sistema Duffy, Sistema P, Sistema
 Lutheran (Lu), Sistema Kell, Sistema Lewis,
 Sistema Kidd (Jk), Sistema Fisher, Sistema I.

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Sistema ABOSistema ABO
 El sistema ABO fue el primer grupo sanguíneo descubierto. Landsteiner enEl sistema ABO fue el primer grupo sanguíneo descubierto. Landsteiner en
1900 descubrió que los glóbulos rojos pueden clasificarse en A, B y O, de1900 descubrió que los glóbulos rojos pueden clasificarse en A, B y O, de
acuerdo a la presencia o ausencia de antígenos reactivos en la superficieacuerdo a la presencia o ausencia de antígenos reactivos en la superficie
de los glóbulos rojos. Sus características son:de los glóbulos rojos. Sus características son:
1.1. Las personas con sangre del tipo A tienen glóbulos rojos que expresanLas personas con sangre del tipo A tienen glóbulos rojos que expresan
antígenos de tipo A en su superficie y anticuerpos contra los antígenos Bantígenos de tipo A en su superficie y anticuerpos contra los antígenos B
en el plasma de su sangre.en el plasma de su sangre.
2.2. Las personas con sangre del tipo B tiene la combinación contraria,Las personas con sangre del tipo B tiene la combinación contraria,
hematíes con antígenos de tipo B en su superficie y anticuerpos contra loshematíes con antígenos de tipo B en su superficie y anticuerpos contra los
antígenos A en el plasma de su sangre.antígenos A en el plasma de su sangre.
3.3. Los individuos con sangre del tipo O no expresan ninguno de los dosLos individuos con sangre del tipo O no expresan ninguno de los dos
antígenos (A o B) en la superficie de sus glóbulos rojos pero tienenantígenos (A o B) en la superficie de sus glóbulos rojos pero tienen
anticuerpos contra ambos tipos, mientras que las personas con tipo ABanticuerpos contra ambos tipos, mientras que las personas con tipo AB
expresan ambos antígenos en su superficie y no fabrican ninguno de losexpresan ambos antígenos en su superficie y no fabrican ninguno de los
dos anticuerpos.dos anticuerpos.

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Sistema ABOSistema ABO
 Herencia del tipo ABOHerencia del tipo ABO
 Son controlados por un solo gen con tres alelos: O (SIN, por no poseer losSon controlados por un solo gen con tres alelos: O (SIN, por no poseer los
antígenos ni del grupo A ni del grupo B), A, B.antígenos ni del grupo A ni del grupo B), A, B.
 El alelo A da tipos A, el B tipos B y el alelo O tipos O siendo A y BEl alelo A da tipos A, el B tipos B y el alelo O tipos O siendo A y B
alelos dominantes sobre O.alelos dominantes sobre O.
 Así, las personas que heredan dos alelos OO tienen tipo O; AA o AO danAsí, las personas que heredan dos alelos OO tienen tipo O; AA o AO dan
lugar a tipos A; y BB o BO dan lugar a tipos B. Las personas AB tienenlugar a tipos A; y BB o BO dan lugar a tipos B. Las personas AB tienen
ambos genotipos debido a que la relación entre los alelos A y B esambos genotipos debido a que la relación entre los alelos A y B es
de codominancia.de codominancia.
 Por tanto, es imposible para un progenitor AB el tener un hijo con tipo O, aPor tanto, es imposible para un progenitor AB el tener un hijo con tipo O, a
excepción de que se de un fenómeno poco común conocido como elexcepción de que se de un fenómeno poco común conocido como el
'fenotipo Bombay' o diversas formas de mutación genética relativamente'fenotipo Bombay' o diversas formas de mutación genética relativamente
extrañas.extrañas.
 Entonces por lo que se puede decir que el alelo A es dominante sobre elEntonces por lo que se puede decir que el alelo A es dominante sobre el
alelo B y esto hace que el alelo O sea un alelo dominante también por esoalelo B y esto hace que el alelo O sea un alelo dominante también por eso
se llama codominancia.se llama codominancia.

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Características del factor deCaracterísticas del factor de
Rhesus “Rh”Rhesus “Rh”
 El factor RH es una proteína adicional que puede estar presente en laEl factor RH es una proteína adicional que puede estar presente en la
membrana de los hematíes. Fue descubierto por los doctores Alexandermembrana de los hematíes. Fue descubierto por los doctores Alexander
Wiener y Karl Landsteiner en 1940 en los monos Macacus Rhesus.Wiener y Karl Landsteiner en 1940 en los monos Macacus Rhesus.
 Cuando una persona tiene esta proteína se le considera que tiene RhCuando una persona tiene esta proteína se le considera que tiene Rh
positivo, pero si está ausente se trata de un Rh negativo.positivo, pero si está ausente se trata de un Rh negativo.
 El factor Rh está constituído por un complejo de seis antígenosEl factor Rh está constituído por un complejo de seis antígenos
fundamentales, formados por tres pares de genes alelos: Cc, Dd y Ee. Elfundamentales, formados por tres pares de genes alelos: Cc, Dd y Ee. El
antígeno de mayor poder sensibilizante es el D, le siguen en importancia elantígeno de mayor poder sensibilizante es el D, le siguen en importancia el
e y el E.e y el E.

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Herencia del factor RhHerencia del factor Rh
 Los genes responsables de este sistema se localizan en el cromosoma 1.Los genes responsables de este sistema se localizan en el cromosoma 1.
Existen dos teorías sobre el control genético:Existen dos teorías sobre el control genético:
Teoría de Fisher:Teoría de Fisher: Tres genes C, D, E (presentan antígeno D aquellasTres genes C, D, E (presentan antígeno D aquellas
combinaciones que contengan el alelo D como por ejemplo cDe).combinaciones que contengan el alelo D como por ejemplo cDe).
Teoría de Wiener:Teoría de Wiener: En determinados casos se expresa un antígeno D débilEn determinados casos se expresa un antígeno D débil
Du (rh-) como consecuencia de:Du (rh-) como consecuencia de:
1. La represión del gen D por un gen C en posición trans (cromosoma1. La represión del gen D por un gen C en posición trans (cromosoma
opuesto).opuesto).
2. La existencia de un alelo Du.2. La existencia de un alelo Du.
3. La formación de un antígeno D incompleto.3. La formación de un antígeno D incompleto.

21
Características del factor RhCaracterísticas del factor Rh
 Antígeno Du.Antígeno Du. Es una variante débil del antígeno D, poco frecuente entreEs una variante débil del antígeno D, poco frecuente entre
los individuos caucasoides, pero común entre los individuos de raza negralos individuos caucasoides, pero común entre los individuos de raza negra
(22%). Los hematíes Du generalmente dan reacciones débiles o negativas(22%). Los hematíes Du generalmente dan reacciones débiles o negativas
con elanticuerpo anti - D, siendo detectados gracias a la prueba indirecta decon elanticuerpo anti - D, siendo detectados gracias a la prueba indirecta de
laantiglobulina (Coombs).laantiglobulina (Coombs).
 Los hematíes DU pueden ser clasificados de acuerdo a tres categorías:Los hematíes DU pueden ser clasificados de acuerdo a tres categorías:
 Variante Du.Variante Du. Presenta una estructura que consta como mínimo de 4Presenta una estructura que consta como mínimo de 4
partes; sifaltan una o más partes del antígeno, el resto puede tener unapartes; sifaltan una o más partes del antígeno, el resto puede tener una
expresión débil. Poresta razón los individuos que pertenecen a dichaexpresión débil. Poresta razón los individuos que pertenecen a dicha
variante, deben ser transfundidoscon sangre Rh(-). Los centros devariante, deben ser transfundidoscon sangre Rh(-). Los centros de
transfusión sanguínea efectúan la prueba para elfactor Du a todos sustransfusión sanguínea efectúan la prueba para elfactor Du a todos sus
donantes Rh(-), ya que la sangre de un Du inyectada a unreceptor Rh (-)donantes Rh(-), ya que la sangre de un Du inyectada a unreceptor Rh (-)
puede producir un este último una sensibilización del mismo alantígeno D.puede producir un este último una sensibilización del mismo alantígeno D.

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Características del factor RhCaracterísticas del factor Rh
 Du adquirido.Du adquirido. La herencia del gen C en posición trans con relación al genLa herencia del gen C en posición trans con relación al gen
D tiene como resultado una expresión débil del antígeno D en los hematíesD tiene como resultado una expresión débil del antígeno D en los hematíes
(Du); los individuos que presentan estas características no producen anti–(Du); los individuos que presentan estas características no producen anti–
D si reciben sangre Rh (+).D si reciben sangre Rh (+).
 Du hereditario.Du hereditario. Algunos individuos Du no pueden ser clasificados como DuAlgunos individuos Du no pueden ser clasificados como Du
adquirido, ni como variante Du, puesto que si bien poseen el antígeno Dadquirido, ni como variante Du, puesto que si bien poseen el antígeno D
completo, éste está débilmente expresado desconociéndose la causa decompleto, éste está débilmente expresado desconociéndose la causa de
este hecho.este hecho.

2323
Banco de SangreBanco de Sangre

24
Procedimiento de trabajoProcedimiento de trabajo
 La muestra llega con el volante del médico con las pruebas a realizar.La muestra llega con el volante del médico con las pruebas a realizar.
Cuando la petición es rosa se trata de una transfusión sanguínea. CuandoCuando la petición es rosa se trata de una transfusión sanguínea. Cuando
se trata de una petición blanca se usa un procedimiento de rutina. En else trata de una petición blanca se usa un procedimiento de rutina. En el
banco de sangre llegan que en su mayoría son de carácter urgentes, en lasbanco de sangre llegan que en su mayoría son de carácter urgentes, en las
que se trabaja en:que se trabaja en:
 Urgencias vitales:Urgencias vitales: Se transfunde según el protocolo estandarizado.Se transfunde según el protocolo estandarizado.
 Rutinas:Rutinas: Grupos de embarazadas, grupos de recién nacidos.Grupos de embarazadas, grupos de recién nacidos.
 Transfusiones:Transfusiones: Urgencias, rutina, transfusiones en el día, intervenciónUrgencias, rutina, transfusiones en el día, intervención
quirúrgica y para reservas (PDA).quirúrgica y para reservas (PDA).

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 Además en esta sección también llegan las bolsas de sangre de losAdemás en esta sección también llegan las bolsas de sangre de los
donantes, que serán clasificadas según el grupo sanguíneo y la fecha dedonantes, que serán clasificadas según el grupo sanguíneo y la fecha de
caducidad. Todo esto se hace mediante la ayuda de tarjetas decaducidad. Todo esto se hace mediante la ayuda de tarjetas de
identificación.identificación.
 Una vez se han separado las bolsas según el grupo sanguíneo, seUna vez se han separado las bolsas según el grupo sanguíneo, se
almacenan según la fecha de caducidad, teniendo las que se caducanalmacenan según la fecha de caducidad, teniendo las que se caducan
antes en la zona delantera, y al fondo estarán las bolsas que caducaránantes en la zona delantera, y al fondo estarán las bolsas que caducarán
más tarde.más tarde.

26
 Tras haber recibido la bolsa de sangre, esta se almacenará en el frigoríficoTras haber recibido la bolsa de sangre, esta se almacenará en el frigorífico
un tiempo en la que se extraerá antes de la fecha de caducidad.un tiempo en la que se extraerá antes de la fecha de caducidad.

27
AparatosAparatos
 Centrífuga de tarjetas.Centrífuga de tarjetas.
 Incubador de tarjetas.Incubador de tarjetas.
 Centrífuga de tubos.Centrífuga de tubos.
 Visor.Visor.
 Agitador de plaquetas.Agitador de plaquetas.
 Pipetas automáticas.Pipetas automáticas.
 Descongelador de plasma.Descongelador de plasma.
 Frigorífico de concentrado de sangre.Frigorífico de concentrado de sangre.
 Congelador de plasma.Congelador de plasma.
 Frigorífico de suero de muestras del paciente.Frigorífico de suero de muestras del paciente.
 PDA.PDA.
 Casillero.Casillero.

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ReactivosReactivos
 Tarjetas:Tarjetas: grupos de adultos, recién nacidos, anticuerpos irregulares,grupos de adultos, recién nacidos, anticuerpos irregulares,
fenotipo, CD (Coombs Directo), tarjeta monoespecífica, tarjeta Du.fenotipo, CD (Coombs Directo), tarjeta monoespecífica, tarjeta Du.
 Líquidos:Líquidos: Anti A, Anti B, Anti D, anti AB, sérico, anticuerpos irregulares (I,Anti A, Anti B, Anti D, anti AB, sérico, anticuerpos irregulares (I,
II y III), Du, reactivo de fenotipo, reactivos panel (11 células), eluído (Flu-II y III), Du, reactivo de fenotipo, reactivos panel (11 células), eluído (Flu-
kit).kit).

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Caso práctico de una transfusiónCaso práctico de una transfusión
de sangrede sangre
 Petición de urgencias para transfundir a paciente para concentrado dePetición de urgencias para transfundir a paciente para concentrado de
hematíes (CH) y PQ (Plaquetas) a las 10:30 del Jueves 19 de abril. Lahematíes (CH) y PQ (Plaquetas) a las 10:30 del Jueves 19 de abril. La
muestra se recibe en banco de sangre.muestra se recibe en banco de sangre.
 Se comprueba el nombre del paciente, el typenex (código de barras) y seSe comprueba el nombre del paciente, el typenex (código de barras) y se
procede a centrifugar la muestra y se da de alta en el sistema informático.procede a centrifugar la muestra y se da de alta en el sistema informático.
 Se centrifuga la muestra y una vez que se ha centrifugado realizaremos lasSe centrifuga la muestra y una vez que se ha centrifugado realizaremos las
siguientes técnicas:siguientes técnicas:

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Determinación de grupoDeterminación de grupo
hemático/Rhhemático/Rh
Mediante esta técnica podremos determinar el grupo sanguíneo y el Rh de unaMediante esta técnica podremos determinar el grupo sanguíneo y el Rh de una
persona. Puede determinarse en tubo y en tarjeta.persona. Puede determinarse en tubo y en tarjeta.
Determinación del grupo sanguíneo en tarjeta.Determinación del grupo sanguíneo en tarjeta. Con esta técnica vamos aCon esta técnica vamos a
determinar el grupo sanguíneo usando una tarjeta con unos reactivos a la quedeterminar el grupo sanguíneo usando una tarjeta con unos reactivos a la que
añadiremos la sangre y el suero del paciente, previamente separados.añadiremos la sangre y el suero del paciente, previamente separados.

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CentrifugaciónCentrifugación
 El procedimiento para llevarlo a cabo sería el siguiente:El procedimiento para llevarlo a cabo sería el siguiente:
1)1) La muestra recibida en un tubo de tapón rosa, tras haber sidoLa muestra recibida en un tubo de tapón rosa, tras haber sido
comprobada junto con la petición del paciente.comprobada junto con la petición del paciente.
2)2) Posteriormente pasamos a colocar el tubo de la centrífuga. Mediante laPosteriormente pasamos a colocar el tubo de la centrífuga. Mediante la
centrifugación podemos separar los componentes sólidos y líquidos decentrifugación podemos separar los componentes sólidos y líquidos de
una muestra obteniendo así 2 fases bien diferenciadas:una muestra obteniendo así 2 fases bien diferenciadas:
 Sedimento.Sedimento. Se trata de los materiales sólidos, en este caso de lasSe trata de los materiales sólidos, en este caso de las
células sanguíneas, que por su peso y densidad han sido depositadas encélulas sanguíneas, que por su peso y densidad han sido depositadas en
la parte baja.la parte baja.
 Sobrenadante.Sobrenadante. Es la parte que queda por encima del sedimentoEs la parte que queda por encima del sedimento
compuesta de suero y las sustancias químicas presentes en la sangre.compuesta de suero y las sustancias químicas presentes en la sangre.

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 En una centrífuga, podemosEn una centrífuga, podemos
visualizar las siguientes partes:visualizar las siguientes partes:
 TapaderaTapadera
 Cámara o gabineteCámara o gabinete
 BaseBase
 Interruptor de encendidoInterruptor de encendido
 Marcador de tiempoMarcador de tiempo
 TacómetroTacómetro
 FrenoFreno
 Control de velocidadControl de velocidad

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 Para poder introducir los tubos correctamente, se ha equilibrar la centrífuga.
Esto consiste en introducir los tubos de manera que si hay dos, estos se
coloarán uno enfrente del otro. Pero si hay varios tubos, se colocan los que
tienen una cantidad similar para así compensar las fuerzas y reducir al
máximo las vibraciones.

34
Determinación grupo SanquíneoDeterminación grupo Sanquíneo
ABO/Rh tarjeta (Diamed)ABO/Rh tarjeta (Diamed)
 Objetivo:Objetivo: Determinar el grupo sanguíneo A, B, AB y O, y también el Rh.Determinar el grupo sanguíneo A, B, AB y O, y también el Rh.
 Desarrollo:Desarrollo:
1)1) Hacemos una solución afresada con 25 uL en 500 uL de suero.Hacemos una solución afresada con 25 uL en 500 uL de suero.
2)2) Se mezcla bien la suspensión para ser usada inmediatamente.Se mezcla bien la suspensión para ser usada inmediatamente.
3)3) Escribimos la identificación en las tarjetas, se resuspende y se añade enEscribimos la identificación en las tarjetas, se resuspende y se añade en
los microtubos 10 uL.los microtubos 10 uL.
4)4) Se coge en la misma tarjeta, pero usando el suero con una cantidad deSe coge en la misma tarjeta, pero usando el suero con una cantidad de
50 uL, se añade 1 gota de Anti – A en el A y otro de anti – B en el B. Se50 uL, se añade 1 gota de Anti – A en el A y otro de anti – B en el B. Se
mezcla la tarjeta.mezcla la tarjeta.
5)5) Se centrifuga durante 10 minutos a 900 r.p.m. y posteriormente, seSe centrifuga durante 10 minutos a 900 r.p.m. y posteriormente, se
procede a la lectura de resultados.procede a la lectura de resultados.

35

36
 En las determinaciones realizadas en tarjeta, usaremos la centrífuga deEn las determinaciones realizadas en tarjeta, usaremos la centrífuga de
tarjetas, que está preparada en la centrifugación de tarjetas.tarjetas, que está preparada en la centrifugación de tarjetas.

37
 Lectura de resultados:Lectura de resultados:
 La presencia del botón en la zona superior nos indicará aglutinación, por loLa presencia del botón en la zona superior nos indicará aglutinación, por lo
que la lectura será positiva. En el grupo sérico debe darse la reacción a laque la lectura será positiva. En el grupo sérico debe darse la reacción a la
inversa tal y como aparece en el hemático (izquierda de la tarjeta).inversa tal y como aparece en el hemático (izquierda de la tarjeta).

38
ABO/Rh en tuboABO/Rh en tubo
 Objetivo:Objetivo: El objetivo de esta técnica también se basa en la detección delEl objetivo de esta técnica también se basa en la detección del
grupo sanguíneo, lo que cambia es que en esta ocasión se realiza engrupo sanguíneo, lo que cambia es que en esta ocasión se realiza en
tubo.tubo.
1)1) Se homogeniza el tubo de la muestra para que se mezcle bien la sangre.Se homogeniza el tubo de la muestra para que se mezcle bien la sangre.
2)2) Se cogen 3 tubos de ensayo y se rotulan con las siguientes letras: A, B ySe cogen 3 tubos de ensayo y se rotulan con las siguientes letras: A, B y
D.D.
3)3) Con ayuda de una pipeta Pasteur se echa una gota de sangre en cadaCon ayuda de una pipeta Pasteur se echa una gota de sangre en cada
tubo.tubo.
4)4) Se añaden 2 gotas de reactivo Anti A al tubo A, Anti B al tubo B y anti DSe añaden 2 gotas de reactivo Anti A al tubo A, Anti B al tubo B y anti D
al D.al D.
5)5) Se mezclan bien y se espera un tiempo hasta que la aglutinación seaSe mezclan bien y se espera un tiempo hasta que la aglutinación sea
visible.visible.

39
 Interpretación:Interpretación:
 Cuando existe aglutinación la reacción será positiva y se observará unCuando existe aglutinación la reacción será positiva y se observará un
botón de hematíes en la base del tubo que al resuspender vuelve abotón de hematíes en la base del tubo que al resuspender vuelve a
depositarse rápidamente.depositarse rápidamente.
 Como dato importante, es destacable señalar que tanto la determinación enComo dato importante, es destacable señalar que tanto la determinación en
tubo del grupo sanguíneo es importante hacerla para realizar latubo del grupo sanguíneo es importante hacerla para realizar la
confirmación tras hacerla en tarjeta.confirmación tras hacerla en tarjeta.
 En este caso la reacción ha salido en el A y el D, por lo que se trata de un AEn este caso la reacción ha salido en el A y el D, por lo que se trata de un A
positivo.positivo.

40

41
Determinación de anticuerposDeterminación de anticuerpos
irregulares y autoanticuerpos enirregulares y autoanticuerpos en
tarjeta (Diamed)tarjeta (Diamed)
 Objetivo:Objetivo:
 Los anticuerpos irregulares son proteínas que reaccionan contra antígenosLos anticuerpos irregulares son proteínas que reaccionan contra antígenos
específicos y que son poco comunes y causan incompatibilidad sanguíneaespecíficos y que son poco comunes y causan incompatibilidad sanguínea
entre donantes y receptores.entre donantes y receptores.
 Los autoanticuerpos son anticuerpos desarrollados por el sistemaLos autoanticuerpos son anticuerpos desarrollados por el sistema
inmunitario que actúan directamente en contra de uno o más antígenos delinmunitario que actúan directamente en contra de uno o más antígenos del
propio individuo.propio individuo.
 En esta técnica detectaremos la presencia de anticuerpos irregulares enEn esta técnica detectaremos la presencia de anticuerpos irregulares en
tarjeta.tarjeta.

42
 Objetivo:Objetivo: Detectar anticuerpos irregulares y autoanticuerpos en tarjeta.Detectar anticuerpos irregulares y autoanticuerpos en tarjeta.
 Se trabaja en una tarjeta de Liss-CoombsSe trabaja en una tarjeta de Liss-Coombs
 Se identifican los anticuerpos con números romanos y en la tarjetaSe identifican los anticuerpos con números romanos y en la tarjeta
ponemos I, II y III y el A de auto.ponemos I, II y III y el A de auto.
 En las 4 primeras se pone el número del paciente y las 2 últimas son lasEn las 4 primeras se pone el número del paciente y las 2 últimas son las
pruebas cruzadas, en las que se cruzan las unidades que se solicitan.pruebas cruzadas, en las que se cruzan las unidades que se solicitan.
 Para los anticuerpos irregulares se emplean 25 nL de suero yPara los anticuerpos irregulares se emplean 25 nL de suero y
posteriormente se adiciona 1 gota de reactivo I, II y III en el pocillo I, II y III.posteriormente se adiciona 1 gota de reactivo I, II y III en el pocillo I, II y III.
 En el A usaremos 50 uL diluído de solución de hematíes y se mezcla conEn el A usaremos 50 uL diluído de solución de hematíes y se mezcla con
25 uL de suero del mismo paciente.25 uL de suero del mismo paciente.
 Posteriormente se incuba a 37ºC, se centrifuga y se procede a la lectura.Posteriormente se incuba a 37ºC, se centrifuga y se procede a la lectura.

43
 Tarjetas introducidas en el incubador.Tarjetas introducidas en el incubador.

44
 Si el botón de hematíes queda en la parte superior del pocillo indicaSi el botón de hematíes queda en la parte superior del pocillo indica
aglutinación y la lectura es positiva.aglutinación y la lectura es positiva.
 Si el botón de hematíes queda en la zona inferior la lectura es negativa.Si el botón de hematíes queda en la zona inferior la lectura es negativa.

45
Pruebas CruzadasPruebas Cruzadas
 Objetivo:Objetivo: Ver compatibilidad entre el suero del paciente y la sangre delVer compatibilidad entre el suero del paciente y la sangre del
donante.donante.
1)1) Se usa un macarrón de la bolsa del donante que se identifica en tubo.Se usa un macarrón de la bolsa del donante que se identifica en tubo.
2)2) Se realiza una dilución de 1 gota de sangre (50 uL) en 500 uL deSe realiza una dilución de 1 gota de sangre (50 uL) en 500 uL de
solución salina.solución salina.
3)3) Se transfiere 50 uL con ayuda de una pipeta a un pocillo.Se transfiere 50 uL con ayuda de una pipeta a un pocillo.
4)4) Posteriormente se transfieren 25 uL del suero del paciente paraPosteriormente se transfieren 25 uL del suero del paciente para
enfrentarlo con la sangre del donante.enfrentarlo con la sangre del donante.
5)5) Se incuba durante 15 minutosSe incuba durante 15 minutos
6)6) A continuación se centrifuga la tarjeta y se procede a la lectura deA continuación se centrifuga la tarjeta y se procede a la lectura de
resultados.resultados.

46
Pruebas CruzadasPruebas Cruzadas
 Si el resultado es positivo, no es posible realizar la transfusión porque la sangre delSi el resultado es positivo, no es posible realizar la transfusión porque la sangre del
donante es incompatible con la sangre del receptor. Siempre que el resultado seadonante es incompatible con la sangre del receptor. Siempre que el resultado sea
positivo, aparecerá un botón de hematíes en la zona superior del pocillo.positivo, aparecerá un botón de hematíes en la zona superior del pocillo.
 Se procederá a la transfusión cuando el resultado sale negativo.Se procederá a la transfusión cuando el resultado sale negativo.

47
Procedimiento de TransfusiónProcedimiento de Transfusión
 Tras haber realizado las pruebas anteriores, se procede a la transfusión deTras haber realizado las pruebas anteriores, se procede a la transfusión de
sangre.sangre.
 Esto se lleva a cabo mediante un sistema informático en el que seEsto se lleva a cabo mediante un sistema informático en el que se
introducen los datos del paciente en el programa informático y seintroducen los datos del paciente en el programa informático y se
transfunde con el sistema PDA.transfunde con el sistema PDA.
 El sistema PDA sirve para ver la trazabilidad de la unidad transfundida.El sistema PDA sirve para ver la trazabilidad de la unidad transfundida.
Inicia el abertura y cierre de la unidad.Inicia el abertura y cierre de la unidad.

48
 En esta imagen podemos visualizar el sistema informático y el PDAEn esta imagen podemos visualizar el sistema informático y el PDA
(Esquina inferior izquierda de la imagen):(Esquina inferior izquierda de la imagen):

49
 Una vez que ha finalizado la transfusión 24 horas después, la peticiónUna vez que ha finalizado la transfusión 24 horas después, la petición
blanca se archiva de 15 a 30 años y la rosa se archiva en el casilleroblanca se archiva de 15 a 30 años y la rosa se archiva en el casillero
(imagen inferior), donde el celador la lleva a la planta para archivarla en la(imagen inferior), donde el celador la lleva a la planta para archivarla en la
historia del paciente.historia del paciente.

5050
Control de calidad internoControl de calidad interno

51
 Este procedimiento está diseñado para controlar los reactivos, laEste procedimiento está diseñado para controlar los reactivos, la
realización de las técnicas de trabajo empleadas y los materiales de lasrealización de las técnicas de trabajo empleadas y los materiales de las
pruebas, así como el personal que realiza dicho trabajo.pruebas, así como el personal que realiza dicho trabajo.
 La casa comercial entrega cada dos meses unos controles internos (grupoLa casa comercial entrega cada dos meses unos controles internos (grupo
hemático-sérico, anticuerpos irregulares, test de Coombs directo, Du yhemático-sérico, anticuerpos irregulares, test de Coombs directo, Du y
fenotipos). Se realizan cada 15 días.fenotipos). Se realizan cada 15 días.
 El objetivo es describir los mecanismos que permitan asegurar la correctaEl objetivo es describir los mecanismos que permitan asegurar la correcta
realización de las técnicas (PNT) de trabajo empleadas.realización de las técnicas (PNT) de trabajo empleadas.

52
Objetivo y alcanceObjetivo y alcance
 Objetivo:Objetivo: Describir los mecanismos que permitan asegurar la correctaDescribir los mecanismos que permitan asegurar la correcta
realización de las técnicas (PNT) de trabajo empleadas.realización de las técnicas (PNT) de trabajo empleadas.
 Alcance:Alcance: Cuánto se establece en éste procedimiento, es de aplicación paraCuánto se establece en éste procedimiento, es de aplicación para
todas las peticiones de hemoderivados realizadas al Servicio detodas las peticiones de hemoderivados realizadas al Servicio de
Transfusión del Hospital Universitario San Agustín de Linares y debe serTransfusión del Hospital Universitario San Agustín de Linares y debe ser
realizado regularmente por cada miembro del personal de la Unidad.realizado regularmente por cada miembro del personal de la Unidad.

53
ReactivosReactivos
 El control de calidad interno contiene:El control de calidad interno contiene:
 5 viales con 4ml de eritrocitos de reactivo humanos procedentes de5 viales con 4ml de eritrocitos de reactivo humanos procedentes de
donantes únicos, a una suspensión de 3-5 %.donantes únicos, a una suspensión de 3-5 %.
 3 viales con 3ml de suero de origen humano.3 viales con 3ml de suero de origen humano.

54
Preparación de las muestrasPreparación de las muestras
 Atemperaremos antes de utilizar: sacar la caja de reactivos del controlAtemperaremos antes de utilizar: sacar la caja de reactivos del control
Interno de la nevera y poner a temperatura ambiente.Interno de la nevera y poner a temperatura ambiente.
 Eritrocitos del control de calidad internoEritrocitos del control de calidad interno (reactivo):(reactivo):
 Cogeremos 5 tubos de cristal y identificaremos como 1,2,3,4,5;Cogeremos 5 tubos de cristal y identificaremos como 1,2,3,4,5;
invertiremos un par de veces( sin hacer espuma, para que seinvertiremos un par de veces( sin hacer espuma, para que se
homogenice bien),pondremos de cada tubo de células (1,2,3,4,5) conhomogenice bien),pondremos de cada tubo de células (1,2,3,4,5) con
una pipeta Pasteur:una pipeta Pasteur:
1)1) Transferimos 500 μl al tubo de cristal identificado como nº 1Transferimos 500 μl al tubo de cristal identificado como nº 1

55
Preperación de las muestrasPreperación de las muestras
 Centrifugaremos durante 1 minuto en centrifuga.Centrifugaremos durante 1 minuto en centrifuga.
 Decantaremos el sobrenadante, quedara un tampón de hematíesDecantaremos el sobrenadante, quedara un tampón de hematíes
(concentrado de hematíes), que utilizaremos para realizar la suspensión(concentrado de hematíes), que utilizaremos para realizar la suspensión
con el Id-Diluent 2:con el Id-Diluent 2:
1)1) 500 μl Id-Diluent 2.500 μl Id-Diluent 2.
2)2) 5-10 μl concentrado de hematíes.5-10 μl concentrado de hematíes.
 Esta dilución esta lista para su utilización dependiendo de la tarjeta y elEsta dilución esta lista para su utilización dependiendo de la tarjeta y el
procedimiento a aplicar.procedimiento a aplicar.

56
Suero para control de calidadSuero para control de calidad
internointerno
 Listos para su uso:Listos para su uso:
1)1) Para realizar ”pruebas séricas”Para realizar ”pruebas séricas”
2)2) Para realizar “procedimientos de detección e identificación dePara realizar “procedimientos de detección e identificación de
anticuerpos”.anticuerpos”.
 Con los reactivos del Control Calidad Interno viene un impreso dondeCon los reactivos del Control Calidad Interno viene un impreso donde
deberemos apuntar los resultados obtenidos, una vez realizados según eldeberemos apuntar los resultados obtenidos, una vez realizados según el
mismo procedimiento usado en rutina para las muestras de pacientes.mismo procedimiento usado en rutina para las muestras de pacientes.

57
Determinación del GrupoDeterminación del Grupo
Sanguíneo ABO Rh/KellSanguíneo ABO Rh/Kell
 Objetivo:Objetivo: Determinar el grupo ABO (hemático/sérico) y el factor Rh (D)Determinar el grupo ABO (hemático/sérico) y el factor Rh (D)
en tarjeta.en tarjeta.
 A) Tarjeta ABO/Rh.A) Tarjeta ABO/Rh. Identificaremos una tarjeta ABO/Rh para cadaIdentificaremos una tarjeta ABO/Rh para cada
muestra de células reactivo incluidas en el Control de Calidad Interno:muestra de células reactivo incluidas en el Control de Calidad Interno:
1)1) Hematíes 1 del CCI.Hematíes 1 del CCI.
4)4) Hematíes 4 del CCIHematíes 4 del CCI
5)5) Hematíes 5 del CCIHematíes 5 del CCI
 Depositar 10-12 μl de la dilución de hematíes en los pocillos con anti-ADepositar 10-12 μl de la dilución de hematíes en los pocillos con anti-A
anti-B, anti-AB, anti-D y control.anti-B, anti-AB, anti-D y control.
 Centrifugar en la centrífuga Diamed y proceder a la lectura.Centrifugar en la centrífuga Diamed y proceder a la lectura.

58
 B) Tarjeta hematíes A1 y B:B) Tarjeta hematíes A1 y B:
 Realizaremos tres grupos directos e inversos en tarjeta de la siguienteRealizaremos tres grupos directos e inversos en tarjeta de la siguiente
manera:manera:
1)1) Hematíes 1 + Suero 1 del CCI.Hematíes 1 + Suero 1 del CCI.
 Depositar 50 μl de dilución de hematíes comerciales A1 y B en los dosDepositar 50 μl de dilución de hematíes comerciales A1 y B en los dos
pocillos.pocillos.
 Añadir 50 μl de suero o plasma del control Interno, en los pocillos deAñadir 50 μl de suero o plasma del control Interno, en los pocillos de
hematíes comerciales.hematíes comerciales.
 Centrifugar en la centrífuga Diamed.Centrifugar en la centrífuga Diamed.
 Proceder a la lectura.Proceder a la lectura.

59
 La presencia de hemólisis indica igualmente positividad.La presencia de hemólisis indica igualmente positividad.
 Si el botón de hematíes baja la lectura es negativa.Si el botón de hematíes baja la lectura es negativa.

60
Coombs DirectoCoombs Directo
 Objetivo:Objetivo: Esta técnica detecta si los hematíes están recubiertos deEsta técnica detecta si los hematíes están recubiertos de
anticuerpos o complemento.anticuerpos o complemento.
 DESARROLLODESARROLLO
 Identificar una tarjeta Diamed LISS/CoombsIdentificar una tarjeta Diamed LISS/Coombs para cada muestra de célulaspara cada muestra de células
reactivo incluida en el Control de Calidad Interno.reactivo incluida en el Control de Calidad Interno.
 Preparar en un tubo debidamente identificado para cada muestra de célulasPreparar en un tubo debidamente identificado para cada muestra de células
reactivo incluidas en el Control de Calidad Interno, una dilución con 10-12 μlreactivo incluidas en el Control de Calidad Interno, una dilución con 10-12 μl
de la dilución tampón de hematíes en 0.5 ml de Id-Diluent 2.de la dilución tampón de hematíes en 0.5 ml de Id-Diluent 2.
 Depositar 50Depositar 50 μlμl de la dilución de hematíes en uno de los pocillos de lade la dilución de hematíes en uno de los pocillos de la
tarjeta identificado como: 1, 2, 3, 4,5.tarjeta identificado como: 1, 2, 3, 4,5.
 Centrifugar en la centrífuga Diamed y proceder a la lectura.Centrifugar en la centrífuga Diamed y proceder a la lectura.

61
Coombs DirectoCoombs Directo
 Si el botón de hematíes queda en la parte superior del pocillo indicaSi el botón de hematíes queda en la parte superior del pocillo indica
 Si el botón de hematíes baja la lectura es negativa.Si el botón de hematíes baja la lectura es negativa.

62
Coombs directoCoombs directo
monoespecíficosmonoespecíficos
 Objetivo:Objetivo: Esta técnica identifica la clase de inmunoglobulina o fracciónEsta técnica identifica la clase de inmunoglobulina o fracción
del complemento causantes de la positividad de un test de Coombs.del complemento causantes de la positividad de un test de Coombs.
 Identificar una tarjeta DC Screning con el número de célulasIdentificar una tarjeta DC Screning con el número de células para cadapara cada
muestra de células reactivo incluida en el Control de Calidad Interno.muestra de células reactivo incluida en el Control de Calidad Interno.

63
Coombs directo monoespecíficosCoombs directo monoespecíficos
 Preparar en un tubo debidamente identificado para cada muestra de célulasPreparar en un tubo debidamente identificado para cada muestra de células
reactivo incluidas en el Control de Calidad Interno, una dilución con 10-12 μlreactivo incluidas en el Control de Calidad Interno, una dilución con 10-12 μl
de la dilución tampón de hematíes en 0.5 ml de Id-Diluent 2.de la dilución tampón de hematíes en 0.5 ml de Id-Diluent 2.
 Depositar 50Depositar 50 μlμl de la dilución de hematíes en uno de los pocillos de lade la dilución de hematíes en uno de los pocillos de la
tarjeta DC Screning identificado como: 1, 2, 3, 4,5.tarjeta DC Screning identificado como: 1, 2, 3, 4,5.
 Centrifugar 10 minutos en la centrífuga Diamed.Centrifugar 10 minutos en la centrífuga Diamed.

64
Coombs directoCoombs directo
monoespecíficosmonoespecíficos
 Si el botón de hematíes queda en la parte superior del pocillo indicaSi el botón de hematíes queda en la parte superior del pocillo indica
 Si el botón de hematíes baja la lectura es negativa.Si el botón de hematíes baja la lectura es negativa.

65
Hematíes para la investigación deHematíes para la investigación de
anticuerpos irregularesanticuerpos irregulares
 Objetivo:Objetivo: Identificar la especificidad (por probabilidades) del anticuerpoIdentificar la especificidad (por probabilidades) del anticuerpo
que descubrimos con la investigación o escrutinio de anticuerposque descubrimos con la investigación o escrutinio de anticuerpos
irregulares.irregulares.
 En una tarjeta LISS-Coombs se enfrentarán estos hematíes I- II – III, aEn una tarjeta LISS-Coombs se enfrentarán estos hematíes I- II – III, a
cada uno de los sueros del CCI de Inmunohematología, incluida en elcada uno de los sueros del CCI de Inmunohematología, incluida en el
Control de Calidad Interno, que contiene un anticuerpo de especificidadControl de Calidad Interno, que contiene un anticuerpo de especificidad
conocida.conocida.
1)1) Suero 1 del CCI.Suero 1 del CCI.

66
anticuerpos irregularesanticuerpos irregulares
 Depositar:Depositar:
1)1) 550 μl0 μl hematíes I + 25 μl delhematíes I + 25 μl del Suero 1 del CCISuero 1 del CCI en el pocillo identificadoen el pocillo identificado
como I.como I.
2)2) 550 μl0 μl hematíes II + 25 μl delhematíes II + 25 μl del Suero 1 del CCISuero 1 del CCI en el pocillo identificadoen el pocillo identificado
como II.como II.
3)3) 550 μl0 μl hematíes III +hematíes III + 25 μl del25 μl del deldel Suero 1 del CCISuero 1 del CCI en el pocilloen el pocillo
identificado como III.identificado como III.
 Incubaremos la ID-Tarjetas durante 15 minutos a 37ºCIncubaremos la ID-Tarjetas durante 15 minutos a 37ºC
 Centrifugar durante 10 minutos.Centrifugar durante 10 minutos.
 Los resultados obtenidos serán reflejados la solicitud adscrita del CCI.Los resultados obtenidos serán reflejados la solicitud adscrita del CCI.

67
anticuerpos irregulares (Panel)anticuerpos irregulares (Panel)
 Objetivo:Objetivo: Identificar la especificidad (por probabilidades) del anticuerpo queIdentificar la especificidad (por probabilidades) del anticuerpo que
descubrimos con la investigación o escrutinio de anticuerpos irregulares.descubrimos con la investigación o escrutinio de anticuerpos irregulares.
 Esta técnica, básicamente es similar a la detección de anticuerposEsta técnica, básicamente es similar a la detección de anticuerpos
irregulares, con la diferencia de que en este caso enfrentamos el suero airregulares, con la diferencia de que en este caso enfrentamos el suero a
una batería de 11 células de grupo 0 ampliamente fenotipadas, y cuyauna batería de 11 células de grupo 0 ampliamente fenotipadas, y cuya
reactividad nos indicará la probable especificidad del anticuerpo en estudio.reactividad nos indicará la probable especificidad del anticuerpo en estudio.

68
 Sacar del frigorífico las cajas con los paneles comerciales de hematíesSacar del frigorífico las cajas con los paneles comerciales de hematíes
papainizados y no papainizados. Comprobar la fecha de caducidad. Darpapainizados y no papainizados. Comprobar la fecha de caducidad. Dar
suavemente varias vueltas a la caja entera con el fin de resuspender lossuavemente varias vueltas a la caja entera con el fin de resuspender los
hematíes de cada frasco.hematíes de cada frasco.
 Rotular: 11 pocillos de tarjeta Diamed ClNa 1 al 11, 11 pocillos de tarjetaRotular: 11 pocillos de tarjeta Diamed ClNa 1 al 11, 11 pocillos de tarjeta
Diamed LISS/Coombs del 1 al 11.Diamed LISS/Coombs del 1 al 11.
 Añadir a cada pocillo 25 μl del control problema: Suero 1 del CCI; Suero 2Añadir a cada pocillo 25 μl del control problema: Suero 1 del CCI; Suero 2
del CCI; Suero 3 del CCI, que nos dio como resultado positivo.del CCI; Suero 3 del CCI, que nos dio como resultado positivo.

69
 Añadir: 50 μl de los hematíes no papainizados del vial 1 a los pocillosAñadir: 50 μl de los hematíes no papainizados del vial 1 a los pocillos
rotulado 1 de las tarjetas Liss/Coombs y así haremos con todos los vialesrotulado 1 de las tarjetas Liss/Coombs y así haremos con todos los viales
hasta el rotulado como 11. Al pocillo número 12 (está destinado para elhasta el rotulado como 11. Al pocillo número 12 (está destinado para el
autocontrol del paciente) de ambas tarjetas no se utilizara (los controles noautocontrol del paciente) de ambas tarjetas no se utilizara (los controles no
tienen auto).tienen auto).
 Incubar en la incubadora Diamed durante 15 minutos a 37º C las tarjetasIncubar en la incubadora Diamed durante 15 minutos a 37º C las tarjetas
Diamed LISS/Coombs.Diamed LISS/Coombs.
 Centrifugar durante 10 minutos.Centrifugar durante 10 minutos.
 Proceder a la lecturaProceder a la lectura
 Los resultados obtenidos serán reflejados la solicitud adscrita del CCI. Y enLos resultados obtenidos serán reflejados la solicitud adscrita del CCI. Y en
el volante de identificación de anticuerpos PANEL.el volante de identificación de anticuerpos PANEL.

70
Control de calidad internoControl de calidad interno
1)1) Todos los resultados dentro del CCI deben ser los esperados.Todos los resultados dentro del CCI deben ser los esperados.
2)2) Si algún resultado no es el esperado se debe repetir prestando especialSi algún resultado no es el esperado se debe repetir prestando especial
cuidado a todos los pasos de la técnica.cuidado a todos los pasos de la técnica.
3)3) Si sigue dando un resultado no esperado se debe informar al hematólogoSi sigue dando un resultado no esperado se debe informar al hematólogo
responsable.responsable.
4)4) Registrar el incidente, medidas tomadas y acciones correctoras llevadas aRegistrar el incidente, medidas tomadas y acciones correctoras llevadas a
cabo.cabo.
 Control de nuevos lotes:Control de nuevos lotes: Se realizará cada vez que se reciba un nuevoSe realizará cada vez que se reciba un nuevo
lote de antisueros líquidos. Se realizará lo antes posible desde que entrelote de antisueros líquidos. Se realizará lo antes posible desde que entre
el lote de reactivos. Se anotarán los resultadosel lote de reactivos. Se anotarán los resultados

71
ResponsabilidadesResponsabilidades
 Es responsabilidad del Personal Técnico encargado del equipo, laEs responsabilidad del Personal Técnico encargado del equipo, la
realización de las técnicas según estos procedimientos y la interpretación yrealización de las técnicas según estos procedimientos y la interpretación y
validación delegada de los resultados.validación delegada de los resultados.
 Es responsabilidad del Hematólogo responsable del Servicio deEs responsabilidad del Hematólogo responsable del Servicio de
Transfusión, la supervisión de todo el proceso y la interpretación yTransfusión, la supervisión de todo el proceso y la interpretación y
validación de los resultados dudosos.validación de los resultados dudosos.

7272
Control de calidad externoControl de calidad externo

73
 Las directrices sobre transfusiones recomiendan efectuar controles
periódicos del material y método de análisis, el modo de trabajo del
personal y los instrumentos y equipos automáticos utilizados. El reactivo de
control debe poseer las mismas características que las muestras de
pacientes y, por lo tanto, tratarse igual que éstas. Estas medidas están
destinadas a asegurar la precisión y fiabilidad de los resultados serológicos
en la determinación de grupos sanguíneos. Al realizar el Control Externo,
permite controlar los reactivos empleados, el método de trabajo y también
los instrumentos utilizados para realizar la determinación de grupos
sanguíneos y la detección de anticuerpos.

74
Control CuatrimestralControl Cuatrimestral
 Se realizaran las determinaciones que nos indiquen en el impreso queSe realizaran las determinaciones que nos indiquen en el impreso que
acompaña a las muestras, habitualmente comprende estudio de grupoacompaña a las muestras, habitualmente comprende estudio de grupo
sanguíneo AB0, Rh y K, investigación de anticuerpos, identificación de lossanguíneo AB0, Rh y K, investigación de anticuerpos, identificación de los
mismos cuando proceda y test de Coombs directo.mismos cuando proceda y test de Coombs directo.
 Objetivo.Objetivo. Describir los mecanismos que permitan asegurar la correctaDescribir los mecanismos que permitan asegurar la correcta
realización de las técnicas de transfusión de hemoderivados y la recepciónrealización de las técnicas de transfusión de hemoderivados y la recepción
adecuada de las muestras precisas.adecuada de las muestras precisas.
 Alcance.Alcance. Cuánto se establece en éste procedimiento, es de aplicación paraCuánto se establece en éste procedimiento, es de aplicación para
todas las peticiones de hemoderivados realizadas al Servicio detodas las peticiones de hemoderivados realizadas al Servicio de
Transfusión del Hospital Universitario S. Agustín de Linares.Transfusión del Hospital Universitario S. Agustín de Linares.

75
Control de nuevos lotesControl de nuevos lotes
 Se realizará cada vez que se reciba un nuevo lote de antisueros líquidos.Se realizará cada vez que se reciba un nuevo lote de antisueros líquidos.
Se realizará lo antes posible desde que entre el lote de reactivos. SeSe realizará lo antes posible desde que entre el lote de reactivos. Se
anotarán los resultados.anotarán los resultados.
 Inspección visual.Inspección visual. Comprobaremos en todos los reactivos que su aspectoComprobaremos en todos los reactivos que su aspecto
es correcto, verificaremos la ausencia de partículas y la ausencia dees correcto, verificaremos la ausencia de partículas y la ausencia de
gelificación.gelificación.

76
ControlesControles
 Se realizan 3 controles por año.Se realizan 3 controles por año.

77
MuestrasMuestras
 Cada control incluye muestras de 2 pacientes:
1) Antes de usarlos, dejar los productos a que alcancen la temperatura
ambiente.
2) Se centrifugarán (los tubos deben centrifugarse como muestras de
paciente normales) las dos muestras, durante 5-10 minutos a 3000 rpm.
3) Separamos los sobrenadantes que pondremos en tubo cristal identificado
con el numero 1 y otro con el numero 2.
4) Trabajaremos las muestras (dos con hematíes 1 - 2 y dos como sueros 1 -
2).
5) Procederemos a realizar las Determinaciones que nos piden en el impreso
del control de calidad Externo.

78
DeterminacionesDeterminaciones
 Grupo ABO y Rh.Grupo ABO y Rh.
 Fenotipo Rh y Kell.Fenotipo Rh y Kell.
 Escrutinio de anticuerpos irregulares (EAI).Escrutinio de anticuerpos irregulares (EAI).
 Identificación de anticuerpos irregulares (IAI).Identificación de anticuerpos irregulares (IAI).
 Coombs directo (CD).Coombs directo (CD).

79
Determinación Grupo ABO-RH enDeterminación Grupo ABO-RH en
 Objetivo.Objetivo. Determinar el grupo ABO (hemático/sérico) y el factor Rh (D) enDeterminar el grupo ABO (hemático/sérico) y el factor Rh (D) en
tarjeta.tarjeta.
1) Identificar la tarjeta con la muestra recibida, después de haberla
centrifugado con el número 1 y otra con el número 2 del control externo.
2) Preparar en un tubo debidamente identificado una dilución con 12.5 μl de
sangre total del control y 0.5 ml de Id-Diluent 2.
3) Depositar 50 μl de la dilución de hematíes en los pocillos con anti-A anti-B,
anti-AB, anti-D y control.
4) Depositar 50 μl de dilución de hematíes comerciales A1 y B en los otros
dos pocillos.
5) Añadir 50 μl de suero o plasma del control Externo, en los pocillos de
hematíes comerciales.
6) Centrifugar 10 minutos en la centrífuga Diamed.
7) Proceder a la lectura.

80

81
 Interpretación:
1) Si el botón de hematíes queda
en la parte superior del pocillo
indica aglutinación y la lectura
es positiva. La gradación de la
positividad se realizará según
figura.
2) La ausencia de hemólisis indica
igualmente positividad.
3) Si el botón de hematíes se
deposita en el fondo del pocillo
la lectura es negativa.
4) Si existe discrepancia entre
grupo sérico y hemático habrá
que resolverla antes de
informar el resultado.

82
Determinación del fenotipo Rh-KellDeterminación del fenotipo Rh-Kell
en tarjeta (Diamed)en tarjeta (Diamed)
 Objetivo:Objetivo: Determinar los antígenos del sistema Rh y Kell (D, C, c, E, e yDeterminar los antígenos del sistema Rh y Kell (D, C, c, E, e y
Kell).Kell).
 Desarrollo:
1) Identificar una tarjeta DiaClon Rh-subgroups+K con el numero del control
(1 – 2).
2) Preparar en un tubo debidamente identificado una dilución con 25 μl de
sangre total del control y 0.5 ml de Id-Diluent 2.
3) Depositar 10-12 μl de la dilución de hematíes en los pocillos con anti-C,
anti-c, anti-E, anti-e, anti-K y Control.
4) Centrifugar 10 minutos en la centrífuga Diamed.
5) Proceder a la lectura.

83
Determinación del fenotipo Rh-KellDeterminación del fenotipo Rh-Kell
en tarjeta (Diamed)en tarjeta (Diamed)
1.1. Si el botón de hematíes queda en la parte superior del pocillo indicaSi el botón de hematíes queda en la parte superior del pocillo indica
2.2. La presencia de hemólisis indica igualmente positividad.La presencia de hemólisis indica igualmente positividad.
3.3. Si el botón de hematíes baja la lectura es negativa.Si el botón de hematíes baja la lectura es negativa.

84
Investigación (escrutinio) deInvestigación (escrutinio) de
Anticuerpos Irregulares en tarjetaAnticuerpos Irregulares en tarjeta
(Diamed)(Diamed)
 Objetivo.Objetivo. Los únicos anticuerpos de grupo que se suelen poseer son losLos únicos anticuerpos de grupo que se suelen poseer son los
anti-A y anti-B. Los demás anticuerpos de grupo no relacionados con elanti-A y anti-B. Los demás anticuerpos de grupo no relacionados con el
sistema AB0, se les conoce como anticuerpos irregulares. Para detectarsistema AB0, se les conoce como anticuerpos irregulares. Para detectar
estos anticuerpos se enfrenta el suero a estudiar a una serie de hematíesestos anticuerpos se enfrenta el suero a estudiar a una serie de hematíes
de grupo 0 que poseen la mayoría de antígenos frente a los cuales estosde grupo 0 que poseen la mayoría de antígenos frente a los cuales estos
anticuerpos son específicos.anticuerpos son específicos.
 Clásicamente cuando esta prueba se utiliza como parte de los testClásicamente cuando esta prueba se utiliza como parte de los test
pretransfusionales se denomina investigación de anticuerpos irregulares, ypretransfusionales se denomina investigación de anticuerpos irregulares, y
cuando se utiliza como parte del protocolo de isoinmunización materno fetalcuando se utiliza como parte del protocolo de isoinmunización materno fetal
se denomina Test de Coombs Indirecto.se denomina Test de Coombs Indirecto.
 Utilizamos un panel de hematíes comerciales que contiene tres tipos deUtilizamos un panel de hematíes comerciales que contiene tres tipos de
hematíes (I, II y III).hematíes (I, II y III).

85
(Diamed)(Diamed)
1)1) Identificar la tarjeta Diamed Liss/Coombs con el número del control (1 – 2)Identificar la tarjeta Diamed Liss/Coombs con el número del control (1 – 2)
y rotular tres pocillos en la tarjeta con los números I, II, III.y rotular tres pocillos en la tarjeta con los números I, II, III.
2)2) Añadir a cada pocillo 25 μl del suero problema.Añadir a cada pocillo 25 μl del suero problema.
3)3) Depositar 50 μl de la dilución de hematíes comerciales Id Diamed I, II y IIIDepositar 50 μl de la dilución de hematíes comerciales Id Diamed I, II y III
en los pocillos rotulados de la tarjeta.en los pocillos rotulados de la tarjeta.
4)4) Incubar durante 10 minutos a 37ºC la tarjeta en la incubadora Diamed.Incubar durante 10 minutos a 37ºC la tarjeta en la incubadora Diamed.
5)5) Centrifugar 10 minutos la tarjeta en la centrífuga Diamed.Centrifugar 10 minutos la tarjeta en la centrífuga Diamed.
6)6) Proceder a la lectura.Proceder a la lectura.

86
(Diamed)(Diamed)
1)1) Si el botón de hematíes queda en la parte superior del pocillo indicaSi el botón de hematíes queda en la parte superior del pocillo indica
2)2) La presencia de hemólisis indica igualmente positividad.La presencia de hemólisis indica igualmente positividad.
3)3) Si existe “arrastre” o presencia de hematíes arriba y abajo, se consideraSi existe “arrastre” o presencia de hematíes arriba y abajo, se considera
positivo, en este caso repetiremos la prueba, ya que ocasionalmente estopositivo, en este caso repetiremos la prueba, ya que ocasionalmente esto
puede estar indicando una falsa aglutinación.puede estar indicando una falsa aglutinación.
4)4) Si el botón de hematíes baja, la lectura es negativa.Si el botón de hematíes baja, la lectura es negativa.
5)5) En caso de lectura positiva, se procederá a la identificación de AAII.En caso de lectura positiva, se procederá a la identificación de AAII.

87
(Diamed)(Diamed)

88
Identificación de AnticuerposIdentificación de Anticuerpos
Irregulares en tarjeta (Diamed)Irregulares en tarjeta (Diamed)
PanelPanel
 Objetivo:Objetivo: Identificar la especificidad (por probabilidades) del anticuerpo queIdentificar la especificidad (por probabilidades) del anticuerpo que
descubrimos con la investigación o escrutinio de anticuerpos irregulares.descubrimos con la investigación o escrutinio de anticuerpos irregulares.
 Esta técnica, básicamente es similar a la detección de anticuerposEsta técnica, básicamente es similar a la detección de anticuerpos
irregulares, con la diferencia de que en este caso enfrentamos el suero airregulares, con la diferencia de que en este caso enfrentamos el suero a
una batería de 11 células de grupo 0 ampliamente fenotipadas, y cuyauna batería de 11 células de grupo 0 ampliamente fenotipadas, y cuya
reactividad nos indicará la probable especificidad del anticuerpo en estudio.reactividad nos indicará la probable especificidad del anticuerpo en estudio.

89
PanelPanel Desarrollo:Desarrollo:
 a) Sacar del frigorífico las cajas con los paneles comerciales de hematíesa) Sacar del frigorífico las cajas con los paneles comerciales de hematíes
papainizados y no papainizados. Comprobar la fecha de caducidad. Darpapainizados y no papainizados. Comprobar la fecha de caducidad. Dar
suavemente varias vueltas a la caja entera con el fin de resuspender lossuavemente varias vueltas a la caja entera con el fin de resuspender los
hematíes de cada frasco.hematíes de cada frasco.
 b) Preparar una suspensión de 10-25 μl de sangre total del control 1 yb) Preparar una suspensión de 10-25 μl de sangre total del control 1 y
control 2, con 0.5 ml de Id-Diluent 2.control 2, con 0.5 ml de Id-Diluent 2.
 c) Rotular : 11 pocillos de tarjeta Diamed LISS/Coombs del 1 al 11.c) Rotular : 11 pocillos de tarjeta Diamed LISS/Coombs del 1 al 11.
 d) Añadir a cada pocillo 25 μl del control problema positivo.d) Añadir a cada pocillo 25 μl del control problema positivo.
 e) Añadir: 50 μl de los hematíes no papainizados del vial 1 a los pocillose) Añadir: 50 μl de los hematíes no papainizados del vial 1 a los pocillos
rotulado 1 de las tarjetas Liss/Coombs y así haremos con todos los vialesrotulado 1 de las tarjetas Liss/Coombs y así haremos con todos los viales
hasta el rotulado como 11.hasta el rotulado como 11.
 Al pocillo número 12 (está destinado para el autocontrol del paciente), enAl pocillo número 12 (está destinado para el autocontrol del paciente), en
estas tarjetas no se utilizara (los controles no tienen auto).estas tarjetas no se utilizara (los controles no tienen auto).

90
PanelPanel
 f) Incubar en la incubadora Diamed durante 15 minutos a 37º C las tarjetasf) Incubar en la incubadora Diamed durante 15 minutos a 37º C las tarjetas
Diamed LISS/Coombs y las tarjetas Diamed ClNa con los hematíesDiamed LISS/Coombs y las tarjetas Diamed ClNa con los hematíes
papainizados.papainizados.
 g) La centrifugación se realizará mediante el ciclo pre programado de lag) La centrifugación se realizará mediante el ciclo pre programado de la
centrífuga Diamed.centrífuga Diamed.
 h) Los resultados se anotaran en los cuadros en blanco que hay a lah) Los resultados se anotaran en los cuadros en blanco que hay a la
izquierda de la hoja de Panel, que viene en cada caja, de la maneraizquierda de la hoja de Panel, que viene en cada caja, de la manera
siguiente:siguiente:
 Encabezar una de las columnas de color blanco como Liss/Coombs yEncabezar una de las columnas de color blanco como Liss/Coombs y
anotar allí los resultados de la lecturaanotar allí los resultados de la lectura
 Otra columna se encabeza como Salino y se anota en ella los resultados deOtra columna se encabeza como Salino y se anota en ella los resultados de
la hilera siguiente.la hilera siguiente.
 Es de suma importancia expresar la aglutinación según la gradaciónEs de suma importancia expresar la aglutinación según la gradación
reseñada en el manual Diamed.reseñada en el manual Diamed.

91
PanelPanel
1)1) Si el botón de hematíes queda en la parte superior del pocillo indicaSi el botón de hematíes queda en la parte superior del pocillo indica
2)2) La presencia de hemólisis indica igualmente positividad.La presencia de hemólisis indica igualmente positividad.
3)3) Si existe un “arrastre” o presencia de hematíes arriba y abajo, seSi existe un “arrastre” o presencia de hematíes arriba y abajo, se
considera positivo.considera positivo.
4)4) Si el botón de hematíes baja, la lectura es negativa.Si el botón de hematíes baja, la lectura es negativa.
5)5) Una vez que tengamos definida la lectura de cada pocillo, se compararáUna vez que tengamos definida la lectura de cada pocillo, se comparará
con las distintas combinaciones del panel comercial y esto nos debe dar lacon las distintas combinaciones del panel comercial y esto nos debe dar la
especificidad del anticuerpo.especificidad del anticuerpo.

92
PanelPanel

93
Titulación de AnticuerposTitulación de Anticuerpos
 ObjetivoObjetivo: El título de un anticuerpo, es la dilución máxima en la que su: El título de un anticuerpo, es la dilución máxima en la que su
presencia puede ser demostrada por aglutinación, y es una forma groserapresencia puede ser demostrada por aglutinación, y es una forma grosera
de valorar la “cantidad” del anticuerpo.de valorar la “cantidad” del anticuerpo.

94
1)1) Rotular los tubos con la dilución del suero (2, 4, 8, 16, 32, 64) y añadirRotular los tubos con la dilución del suero (2, 4, 8, 16, 32, 64) y añadir
0,1 ml de Id solución 2 a todos los tubos excepto al primero.0,1 ml de Id solución 2 a todos los tubos excepto al primero.
2)2) Añadir un volumen igual de suero al primer tubo: pondremos 0,1 ml deAñadir un volumen igual de suero al primer tubo: pondremos 0,1 ml de
diluyente 2 más 0,1 ml de suero a titular.diluyente 2 más 0,1 ml de suero a titular.
3)3) Mezclar con una pipeta limpia varias veces el contenido del segundoMezclar con una pipeta limpia varias veces el contenido del segundo
tubo y transferir 0,1 ml al siguiente tubo. Repetir el procedimiento contubo y transferir 0,1 ml al siguiente tubo. Repetir el procedimiento con
todas las diluciones, utilizando una punta de pipeta nueva con cada tubo.todas las diluciones, utilizando una punta de pipeta nueva con cada tubo.
4)4) El volumen del último tubo se guarda en un tubo limpio por si seEl volumen del último tubo se guarda en un tubo limpio por si se
requiriesen nuevas diluciones.requiriesen nuevas diluciones.

95
 5. Rotular una tarjeta LISS/Coombs con el número de identificación del5. Rotular una tarjeta LISS/Coombs con el número de identificación del
paciente y en cada pocillo con las diluciones de los tubos empezando por elpaciente y en cada pocillo con las diluciones de los tubos empezando por el
segundo tubo (2, 4, 8, 16, 32, 64).segundo tubo (2, 4, 8, 16, 32, 64).
 6. Dispensar en cada pocillo 50 μl de hematíes en suspensión al 0.8% (los6. Dispensar en cada pocillo 50 μl de hematíes en suspensión al 0.8% (los
hematíes deben poseer el antígeno frente al que se dirige el anticuerpo ahematíes deben poseer el antígeno frente al que se dirige el anticuerpo a
titular y ser compatibles ABO con el suero problema).titular y ser compatibles ABO con el suero problema).
 7. Añadir a cada pocillo 25 μl de la dilución correspondiente.7. Añadir a cada pocillo 25 μl de la dilución correspondiente.
 8. Incubar durante 10 minutos la tarjeta en la incubadora Diamed.8. Incubar durante 10 minutos la tarjeta en la incubadora Diamed.
 9. Centrifugar la tarjeta en la centrífuga Diamed.9. Centrifugar la tarjeta en la centrífuga Diamed.
 10. Proceder a la lectura.10. Proceder a la lectura.

96
 Observaciones:Observaciones:
 Es una técnica semicuantitativa, para obtener resultados fiables debenEs una técnica semicuantitativa, para obtener resultados fiables deben
evitarse variaciones.evitarse variaciones.
 El pipeteo es esencial, utilizaremos pipetas con puntas desechables queEl pipeteo es esencial, utilizaremos pipetas con puntas desechables que
serán cambiadas tras cada dilución.serán cambiadas tras cada dilución.
 Se utilizarán los tiempos y temperaturas de incubación óptimos para cadaSe utilizarán los tiempos y temperaturas de incubación óptimos para cada
anticuerpo a titular.anticuerpo a titular.

97
 El título es el resultado obtenido como positivo en el tubo de mayor dilución.El título es el resultado obtenido como positivo en el tubo de mayor dilución.
 En estudios comparativos, una diferencia se considerará significativa aEn estudios comparativos, una diferencia se considerará significativa a
partir de 3 diluciones. Una diferencia en la puntuación de más de 10, separtir de 3 diluciones. Una diferencia en la puntuación de más de 10, se
considera arbitrariamente significativa. Las diferencias de puntuación enconsidera arbitrariamente significativa. Las diferencias de puntuación en
distintos sueros indican que los sueros tienen intensidades de reaccióndistintos sueros indican que los sueros tienen intensidades de reacción
distintas.distintas.

98
Prueba Directa de la AntiglobulinaPrueba Directa de la Antiglobulina
(“Coombs-Directo”) en tarjeta(“Coombs-Directo”) en tarjeta
(Diamed)(Diamed)
 Objetivo:Objetivo: Esta técnica detecta si los hematíes están recubiertos deEsta técnica detecta si los hematíes están recubiertos de
anticuerpos o complemento.anticuerpos o complemento.
1)1) Identificar una tarjeta Diamed LISS/Coombs con el nombre y apellidos delIdentificar una tarjeta Diamed LISS/Coombs con el nombre y apellidos del
paciente y/o el número de identificación de la muestra.paciente y/o el número de identificación de la muestra.
2)2) Preparar una dilución con 25 μl de sangre total en 0.5 ml de Id-Diluent 2,Preparar una dilución con 25 μl de sangre total en 0.5 ml de Id-Diluent 2,
en un tubo debidamente identificado.en un tubo debidamente identificado.
3)3) Depositar 50 μl de la dilución de hematíes en uno de los pocillos de laDepositar 50 μl de la dilución de hematíes en uno de los pocillos de la
tarjeta.tarjeta.
4)4) Centrifugar en la centrífuga Diamed.Centrifugar en la centrífuga Diamed.
5)5) Proceder a la lectura.Proceder a la lectura.

99
Prueba Directa de la AntiglobulinaPrueba Directa de la Antiglobulina
(“Coombs-Directo”) en tarjeta(“Coombs-Directo”) en tarjeta
(Diamed)(Diamed)
 Si el botón de hematíes baja la lectura es negativa.Si el botón de hematíes baja la lectura es negativa.

100
Evaluación de resultados: ControlEvaluación de resultados: Control
de calidad externode calidad externo
 Todos los resultados dentro del CCE deben ser los esperados.Todos los resultados dentro del CCE deben ser los esperados.
 Si existe un resultado no esperado se revisará los controles de calidad enSi existe un resultado no esperado se revisará los controles de calidad en
relación con el test que haya fallado y si es preciso se repetirá el CCI derelación con el test que haya fallado y si es preciso se repetirá el CCI de
ese reactivo.ese reactivo.
 Registrar el incidente, medidas tomadas y acciones correctoras llevadas aRegistrar el incidente, medidas tomadas y acciones correctoras llevadas a
cabo.cabo.
 Una vez terminado se enviaran todos los resultados se remiten víaUna vez terminado se enviaran todos los resultados se remiten vía
informática. Se accede a través de:www.hemasoft.com/eqc.informática. Se accede a través de:www.hemasoft.com/eqc.
 A continuación hay que introducir en los tres apartados que aparecenA continuación hay que introducir en los tres apartados que aparecen
(Código de participante, Nombre de usuario y Contraseña) el numero de(Código de participante, Nombre de usuario y Contraseña) el numero de
participante que hay asignado.participante que hay asignado.

101
 De la Dirección del Servicio de Transfusión:De la Dirección del Servicio de Transfusión:
 Planificar y dirigir las líneas de calidad del laboratorio dePlanificar y dirigir las líneas de calidad del laboratorio de
inmunohematología.inmunohematología.
 Asegurar que el laboratorio de inmunohematología participe en el control yAsegurar que el laboratorio de inmunohematología participe en el control y
evaluación de la calidad de sus procesos.evaluación de la calidad de sus procesos.
 Determinar los requerimientos de calidad analítica.Determinar los requerimientos de calidad analítica.
 Supervisar la implementación, evaluación y registro del sistema de calidadSupervisar la implementación, evaluación y registro del sistema de calidad
analítico.analítico.

102
 Del Responsable de Calidad:Del Responsable de Calidad:
 Trabajar en estrecha colaboración con los facultativos para implementar elTrabajar en estrecha colaboración con los facultativos para implementar el
sistema de calidad analítico.sistema de calidad analítico.
 Evaluar y aplicar acciones de mejora en el CCE.Evaluar y aplicar acciones de mejora en el CCE.

103
 Del personal Técnico:Del personal Técnico:
 Preparar y reconstituir losPreparar y reconstituir los
materiales control.materiales control.
 Procesar los ensayosProcesar los ensayos
correspondientes para cadacorrespondientes para cada
magnitud establecida de formamagnitud establecida de forma
paralela a los ensayos reales enparalela a los ensayos reales en
número, niveles y frecuencia denúmero, niveles y frecuencia de
acuerdo al protocolo establecido.acuerdo al protocolo establecido.
 Comprobar los resultados delComprobar los resultados del
control de calidad interno y aplicarcontrol de calidad interno y aplicar
criterios de aceptación de loscriterios de aceptación de los
mismos.mismos.
 Informar los resultados alInformar los resultados al
responsable del Área para la tomaresponsable del Área para la toma
de decisiones.de decisiones.

104104
Gestión de ResiduosGestión de Residuos

105
 Objetivo.Objetivo. El objeto del presente capítulo es establecer las instrucciones yEl objeto del presente capítulo es establecer las instrucciones y
criterios que habrá de seguir el personal de la Unidad de Gestión Clínica decriterios que habrá de seguir el personal de la Unidad de Gestión Clínica de
Hematología y hemoterapia sobre gestión de residuos, además de permitirHematología y hemoterapia sobre gestión de residuos, además de permitir
que el personal que trabaja en extracciones sanguíneas laboratorio de laque el personal que trabaja en extracciones sanguíneas laboratorio de la
unidad, tenga el conocimiento básico sobre residuos, ya que una correctaunidad, tenga el conocimiento básico sobre residuos, ya que una correcta
segregación y manipulación de los mismos es fundamental para minimizarsegregación y manipulación de los mismos es fundamental para minimizar
el impacto sobre el Medio Ambiente, además de ser una obligación legal.el impacto sobre el Medio Ambiente, además de ser una obligación legal.
 Alcance.Alcance. Este procedimiento se aplica a los aspectos relacionados con laEste procedimiento se aplica a los aspectos relacionados con la
gestión de residuos dentro de la U.G.C. de Hematología y Hemoterapiagestión de residuos dentro de la U.G.C. de Hematología y Hemoterapia
pero siempre englobado dentro del más amplio y detallado Plan de Gestiónpero siempre englobado dentro del más amplio y detallado Plan de Gestión
de Residuos del Hospital Universitario San Agustín.de Residuos del Hospital Universitario San Agustín.
 Referencias.Referencias. Plan de gestión de residuos del Hospital Universitario SanPlan de gestión de residuos del Hospital Universitario San
Agustín y plan de gestión de Residuos del SAS.Agustín y plan de gestión de Residuos del SAS.

106
 Procedimiento.Procedimiento. Denominamos Residuo Sanitario a todo aquel generadoDenominamos Residuo Sanitario a todo aquel generado
en cualquier establecimiento o servicio en el que se desarrollen actividadesen cualquier establecimiento o servicio en el que se desarrollen actividades
de atención a la salud humana. El material sanitario solo debe considerarsede atención a la salud humana. El material sanitario solo debe considerarse
residuo a partir del momento en que se desecha, porque su utilidad oresiduo a partir del momento en que se desecha, porque su utilidad o
manejo clínico seda definitivamente por concluido.manejo clínico seda definitivamente por concluido.
 Los residuos se clasifican en cinco grupos y se representan en el siguienteLos residuos se clasifican en cinco grupos y se representan en el siguiente
cuadro:cuadro:

108
 Cada tipo de residuo se recogerá en su propio contenedor. No seCada tipo de residuo se recogerá en su propio contenedor. No se
mezclarán residuos de diferente tipo en un mismo contenedor.mezclarán residuos de diferente tipo en un mismo contenedor.
 -- Residuos de tipo IResiduos de tipo I (sin contaminación específica, papel, cartón, material(sin contaminación específica, papel, cartón, material
de secretaría, envases no contaminados) se pueden recoger en bolsas dede secretaría, envases no contaminados) se pueden recoger en bolsas de
tipo doméstico.tipo doméstico.
 -- Residuos de tipo IIResiduos de tipo II (residuos contaminados con sangre u otros líquidos(residuos contaminados con sangre u otros líquidos
biológicos que no esté incluido en el grupo III) se recogerán en bolsasbiológicos que no esté incluido en el grupo III) se recogerán en bolsas
opacas de mayor espesor que las domésticas.opacas de mayor espesor que las domésticas.
 -- Residuos de tipo IIIResiduos de tipo III (sangre y hemoderivados en forma líquida, cultivos y(sangre y hemoderivados en forma líquida, cultivos y
reservas de agentes infecciosos, residuos anatómicos, materialreservas de agentes infecciosos, residuos anatómicos, material
contaminado con sangre o líquidos biológicos procedentes de pacientescontaminado con sangre o líquidos biológicos procedentes de pacientes
con enfermedades infecciosas transmisibles, agujas, y material cortante ocon enfermedades infecciosas transmisibles, agujas, y material cortante o
punzante). Se recogerán en recipientes rígidos específicos, impermeables,punzante). Se recogerán en recipientes rígidos específicos, impermeables,
herméticos y a prueba de pinchazos.herméticos y a prueba de pinchazos.

109
 -- Residuos de tipo IVResiduos de tipo IV (productos químicos y radiactivos). Son productos(productos químicos y radiactivos). Son productos
que no pueden eliminarse por el sistema general de alcantarillado y, porque no pueden eliminarse por el sistema general de alcantarillado y, por
tanto, se recogerán en recipientes especiales para su eliminación, que setanto, se recogerán en recipientes especiales para su eliminación, que se
etiquetarán haciendo constar pictogramas indicadores de la naturaleza deetiquetarán haciendo constar pictogramas indicadores de la naturaleza de
los riesgos.los riesgos.
 Los residuos de tipo I y II pueden ser eliminados en contenedores urbanosLos residuos de tipo I y II pueden ser eliminados en contenedores urbanos
controlados; los de tipo III han de ser tratados mediante incineración,controlados; los de tipo III han de ser tratados mediante incineración,
desinfección o esterilización, dentro o fuera del centro donde se handesinfección o esterilización, dentro o fuera del centro donde se han
generado. Los de tipo IV requieren un tratamiento específico según el tipogenerado. Los de tipo IV requieren un tratamiento específico según el tipo
de peligrosidad que presenten.de peligrosidad que presenten.

110
 Los productos de reacción de reactivos con especímenes biológicos, asíLos productos de reacción de reactivos con especímenes biológicos, así
como los efluentes de equipos analíticos, deberán recogerse en recipientescomo los efluentes de equipos analíticos, deberán recogerse en recipientes
que contengan un desinfectante adecuado (p.ej, lejía de 1 g. de cloro libre)que contengan un desinfectante adecuado (p.ej, lejía de 1 g. de cloro libre)
para, posteriormente, ser vertidos en el sistema de desagüe aclarándolospara, posteriormente, ser vertidos en el sistema de desagüe aclarándolos
con abundante agua corriente.con abundante agua corriente.
 Los tipos de contenedores utilizados para los residuos sanitarios delLos tipos de contenedores utilizados para los residuos sanitarios del
laboratorio de la UGC de Hematología y Hemoterapia del Hospitallaboratorio de la UGC de Hematología y Hemoterapia del Hospital
Universitario San Agustín son:Universitario San Agustín son:
 GRUPO IGRUPO I:: se recogen en bolsas de color negro.se recogen en bolsas de color negro.
 GRUPO IIGRUPO II: en bolsas de color marrón los cuales están destinados a: en bolsas de color marrón los cuales están destinados a
residuos sanitarios asimilables a urbanos. Estos serían gasas, pipetas deresiduos sanitarios asimilables a urbanos. Estos serían gasas, pipetas de
plástico, guantes, envases, papel de secarse las manos (este nunca debeplástico, guantes, envases, papel de secarse las manos (este nunca debe
depositarse en contenedor para papel reciclado). En estos contenedoresdepositarse en contenedor para papel reciclado). En estos contenedores
también se depositarán residuos procedentes de los analizadores comotambién se depositarán residuos procedentes de los analizadores como
cubetas de reacción... que pese a llevar restos de suero, estos son encubetas de reacción... que pese a llevar restos de suero, estos son en
cantidad muy pequeña.cantidad muy pequeña.

111
 GRUPO IIIGRUPO III::
 Grupo III.aGrupo III.a:: se recogen en bolsas de color rojo y en contenedoresse recogen en bolsas de color rojo y en contenedores
reutilizables o de un solo uso (en este caso no será necesario el uso de lareutilizables o de un solo uso (en este caso no será necesario el uso de la
bolsa), de color verde. Estos contenedores están destinadosbolsa), de color verde. Estos contenedores están destinados
fundamentalmente a sangre y hemoderivados (>100 ml) y residuosfundamentalmente a sangre y hemoderivados (>100 ml) y residuos
sanitarios infecciosos. Por tanto, en los contenedores verdes iránsanitarios infecciosos. Por tanto, en los contenedores verdes irán
fundamentalmente tubos con sangre: suero de pruebas pretransfusionales,fundamentalmente tubos con sangre: suero de pruebas pretransfusionales,
coagulación y hemogramas y las tarjetas de grupos sanguíneos.coagulación y hemogramas y las tarjetas de grupos sanguíneos.
 En estos contenedores verdes también se vierten los residuos cortantes yEn estos contenedores verdes también se vierten los residuos cortantes y
punzantes que se recogerán previamente en contenedores específicos ypunzantes que se recogerán previamente en contenedores específicos y
cuya tapa esté dotada de un mecanismo adecuado de desactivación de loscuya tapa esté dotada de un mecanismo adecuado de desactivación de los
dispositivos dotados con elementos cortantes o punzantes insertados endispositivos dotados con elementos cortantes o punzantes insertados en
forma de lanza o roscadas.forma de lanza o roscadas.

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